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本研究主要针对普通小麦（Triticum aestivum） 中CRISPR-Cas12a系统编辑效率低的问题，提出并验证了一种高效的基因编辑策略。通过顶端分生组织（Shoot Apical Meristem, SAM）递送结合温度优化与内含子优化的Cas12a变体，显著提高了小麦中Cas12a介导的基因编辑效率。
主要研究方法
构建Cas12a表达载体：针对小麦基因TaPDS设计crRNA。
SAM递送与温度优化：通过biolistic方法将载体递送至SAM，并在递送后进行不同温度（22°C、26°C、30°C、34°C）培养。
Cas12a变体比较：测试野生型LbCas12a、ttLbCas12a、LbCas12a-RRV及其内含子优化版本。
多目标验证：在多个小麦基因（Ta-TS60-A、Ta-TS112-A等）上进行编辑验证。
品种适应性测试：在三个不同小麦品种（Fielder、WL711、Corrigin）中验证方法的通用性。
关键发现
30°C培养显著提升编辑效率：递送后30°C培养7天，编辑效率最高，且不影响植株存活。
内含子优化的Cas12a变体编辑效率更高：比非内含子版本高出2倍以上。
方法适用于多个小麦基因和品种：证明该方法具有较好的通用性和可重复性。
可实现多拷贝基因同时编辑：成功在小麦六倍体基因组中同时编辑多个等位基因。
研究意义
该研究为小麦基因编辑提供了一种高效、通用、无需组织培养的新方法，尤其适用于难以转化的小麦品种，为小麦功能基因组学和育种研究提供了有力工具。
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